Agar Salmonella-Shigella osnova, pripravek in uporaba



The Salmonella-Shigella agar znan tudi kot SS agar, je zmerno selektiven in diferencialen medij, posebej zasnovan za izolacijo enteropatogenih bakterij iz rodov Salmonella in Shigella iz okoljskih in kliničnih vzorcev..

SS agar ima kompleksno sestavo; Sestavljen je iz mesnega ekstrakta, peptona, laktoze, žolčnih soli, natrijevega citrata, natrijevega tiosulfata, železovega citrata, agarja, nevtralne rdeče, svetlo zelene in destilirane vode. Zaradi velike selektivnosti je mogoče posaditi vzorce z obilno mešano floro.

V mikrobioloških laboratorijih se medij Salmonella-Shigella široko uporablja za raziskovanje prisotnosti salmonele in šigele v vzorcih drvenih iztrebkov, odplak, pitne vode in hrane..

Včasih je treba za obnovo sevov salmonele uporabiti pred-obogatitveno juho (bujon za laktozo) in obogatitev (selenitna cistinska brozga).

Ti koraki so potrebni, kadar obstaja sum, da je obstoj salmonele v zelo nizki količini, ali kadar se sev lahko zlorabi zaradi procesov, značilnih za industrijsko proizvodnjo, predvsem predelanih živil. Priporočljivo je tudi obogatiti vzorce blata pri bolnikih, ki so bili zdravljeni z antibiotiki.

Nato lahko obogateno juho zasejamo na Salmonella-Shigella agar in druge podobne medije, kot so ksilozni agar, deoksisiloksan lizin (XLD) in enterični Hektoen agar (HE)..

Indeks

  • 1 Fundacija
    • 1.1 Hranilna moč
    • 1.2 Doslednost
    • 1.3 Selektivno
    • 1.4 Diferenca
  • 2 Priprava
  • 3 Uporabite
  • 4 Omejitve
  • 5 Nadzor kakovosti
  • 6 Reference

Fundacija

Vsaka komponenta gojišča kulture Salmonella-Shigella ima specifično funkcijo, zmes pa kot celota daje lastnosti, ki jih označujejo..

Hranilna moč

Mesni ekstrakt in pepton (razgrajeni kazein in živalsko tkivo) zagotavljata potrebna hranila (nitrogeni, ogljik in vitamini) za razvoj mikroorganizmov, ki lahko prenašajo ostale sestavine.

Doslednost

Agar-agar je odgovoren za zagotavljanje trdne konsistence mediju.

Selektivno

Ta medij je zelo selektiven, ker vsebuje žolčne soli, natrijev citrat in svetlo zeleno. Zato zavira rast vseh Gram-pozitivnih bakterij in večino gram-negativnih bacilov, vključno z nekaterimi koliformnimi bakterijami..

Medtem ko bakterije iz rodu Salmonella in nekateri sevi Shigella podpirajo te spojine.

Predvsem je rod Salmonella zelo odporen na žolčne soli, tako da lahko živijo v žolčniku pri nekaterih nosilcih, ki nenehno izločajo bakterije skozi blato..

Diferencial

Laktoza je fermentirajoči ogljikov hidrat, ki pomaga razlikovati laktozne fermentne seve iz nefermentirajočih sevov. To lastnost dokazuje prisotnost indikatorja pH, ki je v tem mediju fenol rdeč.

Sevi za fermentacijo laktoze dajejo rdeče kolonije, nefermentirajoči sevi pa so brezbarvni. Ta značilnost je pomembna, ker salmonela in šigela ne fermentirata laktoze.

Po drugi strani pa ta medij vsebuje natrijev tiosulfat kot vir žvepla in železov citrat kot vir železa. Obe spojini sta sposobni razlikovati bakterije, ki lahko proizvajajo vodikov sulfid. Ti reagirajo tako, da tvorijo črni precipitat netopnega in vidnega železovega sulfida.

Ta lastnost ima nekaj sevov rodu Salmonella. Običajno so njihove kolonije brezbarvne ravne s črno piko v središču. Ostali salmonele ne proizvajajo H2In se razvijejo kot brezbarvne kolonije.

Po drugi strani pa so kolonije rodu Shigella brezbarvne, brez črnenja.

Priprava

To pomeni, da je zelo enostavno pripraviti.

Stehtamo 63 g dehidriranega komercialnega medija in raztopimo v enem litru destilirane vode. Raztopino segrejemo in mešamo. Zmes lahko doseže vrelišče do minut.

Ta medij ne sme avtoklavirati. Po raztapljanju se postreže neposredno na enojne ali dvojne sterilne plošče.

Ko se strdi, so razporejene na obrnjeni način v izdelovalci plakov in shranjene v hladilniku (2–8 ° C), dokler se ne uporabijo.

Sredstvo po pripravi mora biti pH 7,2 ± 0,2 in oranžno rdeče.

Pomembno je, da pustite, da se plošče kaljejo pred sejanjem vzorcev. Prvotni vzorec lahko neposredno sejate, izpraznite material na del agarja in nato odtisnite z izčrpanjem.

V primeru uporabe obogatene juhe, prehodimo del selenitne juhe in sejamo z drigalsko lopatico.

Inkubiramo 24 ur pri 37 ° C v aerobiozi.

Upoštevajte, da se lahko količina tehtanja gramov in končni pH medija razlikuje od ene komercialne hiše do druge. Osnovna plošča medija vedno prinaša indikacije za njeno pripravo.

Uporabite

Pogosto se uporablja pri analizi kultur blata in pri mikrobiološki študiji ostankov vzorcev vode, pitne vode in hrane.

Pogosto so pripravljene dvojne plošče, na eni strani pa je nameščen salmonelin šigelin agar, na drugi strani pa XLD agar..

Omejitve

-Nekateri sevi Shigella v tem mediju ne rastejo. Zato ni priporočljivo za primarno izolacijo tega rodu.

-Vsaka čista kolonija s črnim središčem ne kaže na salmonelo; za pravilno identifikacijo je treba opraviti biokemične teste, saj se kolonije nekaterih sevov Proteus ne razlikujejo od kolonij salmonele.

-Dehidrirani medij mora biti previden pri izpostavljenosti okolju, saj je zelo higroskopičen. Zato ga je treba hraniti v suhem in dobro zaprtem okolju. Odprto za zelo kratka obdobja.

-Sčasoma se lahko žolčne soli v mediju precipitirajo, tako da tvorijo podobne podobe v agarju, vendar to ne vpliva na rezultate..

-Nekateri sevi Shigella lahko počasi fermentirajo laktozo.

Nadzor kakovosti

Da bi dokazali, da medij deluje pravilno, je priporočljivo, da posadite znane ali certificirane kontrolne seve in opazujete, če rast ustreza pričakovanim značilnostim..

V ta namen, sevi. \ T E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella Typhimurium o Enterococcus faecalis.

Pričakovani rezultati so:

Escherichia coli --rožnate izbočene kolonije.

Enterobacter in Klebsiella- velike kolonije in rdeča ali rožnata sluznica.

Shigella flexneri --čiste ali brezbarvne ravne kolonije.

Salmonella typhimurium - brezbarvne kolonije s črnim središčem.

Enterococcus faecalis-- popolno zaviranje.

Reference

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratoriji. Salmonella-Shigella agar. 2009. Na voljo na: f-soria.es
  2. Laboratorij BD. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Na voljo na: bd.com
  3. Laboratoriji Britania. Agar Salmonella-Shigella. 2015. Na voljo na: britanialab.com
  4. Valtek diagnostika. Agar Salmonella-Shigella (SS agar) .2010. Na voljo na: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiološka diagnoza Bailey & Scott. 12 ed. Uvodnik Panamericana S.A. Argentina.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka diagnoza. 5. izd. Uvodnik Panamericana S.A. Argentina.