Cetrimida agar temelj, pripravek, uporaba



The cetrimid agar ali cetrimid je selektivno trdno gojišče, zasnovano za izolacijo Pseudomonas aeruginosa. Temelji na poudarjanju proizvodnje pigmentov, značilnih za to vrsto, in je nastala iz modifikacije Tech agarja, ki so ga ustvarili King, Ward in Raney.

Prvotna formula je vsebovala magnezijeve kloridne soli, kalijev sulfat, razklop pankreasne želatine in agar-agar. Sprememba formule je obsegala dodatek cetrimida (cetil trimetil amonijev bromid) in glicerola \ t.

Cetrimidni agar je uporaben za mikrobiološko študijo vzorcev, kjer je prisotna Pseudomonas aeruginosa. Opozoriti je treba, da je ta bakterija zelo pomembna, saj se čeprav je del običajne mikrobiote v okolju, pogosto obnaša kot oportunistični patogen..

Zato je ena izmed najpogostejših težav, ki jih povzroča ta klic, bolnišnične okužbe, to so tiste, ki se pojavljajo v bolnišničnem okolju, napadajo bolnike z depresivnim imunskim sistemom..

Po drugi strani pa so zaradi afinitete, ki jo ima ta mikroorganizem z vlago, najbolj ranljivi cilji kontaminacije: pomoč pri dihanju, zdravila, razpršilci, vodni viri, klimatske naprave, razkužila, milne raztopine, injekcijske raztopine, odprte rane. med drugim tudi katetri, urinski katetri.

V tem smislu je cetrimidni agar uporaben za izvajanje mikrobioloških kontrol in pridelkov za predhodno imenovane elemente.

Indeks

  • 1 Fundacija
    • 1.1 Razlaga
  • 2 Priprava
  • 3 Uporabe
  • 4 Seeded
  • 5 Omejitve
  • 6 Nadzor kakovosti
  • 7 Reference

Fundacija

Cetrimid agar temelji na sposobnosti medija za spodbujanje rasti P. aeruginosa, spodbujajo proizvodnjo njihovih pigmentov in s tem zavirajo rast drugih mikroorganizmov.

Te lastnosti so posledica funkcije, ki jo izpolnjuje vsaka njena komponenta. Prisoten želatinasti pepton služi kot vir dušika, vitaminov in mineralov. Glicerol ali glicerin deluje kot vir ogljika.

Po drugi strani je cetrimid (cetil trimetil amonijev bromid) snov, ki zavira rast drugih bakterij kot P. aeruginosa, vključno z drugimi vrstami, ki spadajo v isti rod.

Do inhibicije pride, ker cetramid deluje kot kationski detergent, ki destabilizira plazemsko membrano večine bakterij, razen P. aeruginosa in nekatere druge, ki uspejo preživeti.

Po drugi strani vsebuje magnezijev klorid in kalijev sulfat. Te spojine stimulirajo fenotipsko izražanje, povezano z zmogljivostjo Pseudomonas aeruginosa pridelave različnih pigmentov, med njimi: pocianina, pioverdina, piorubina, piomelanina in fluoresceina. Končno vsebuje agar-agar, ki daje trdno konsistenco.

Razlaga

Razlaga rasti, pridobljene v tem agarju, je narejena na naslednji način:

Opazovanje okroglih, gladkih kolonij z rednimi robovi, ki proizvajajo modro-zelene, zelene, rjave ali rdečkaste pigmente, plus emisije sadnega vonja (aminoacetofenon), je verjeten rezultat prisotnosti te bakterije v navedenem vzorcu..

Po drugi strani pa kaže na to P. aeruginosa opazovanje svetlo rumenkasto-zelenega pigmenta na kolonijah, ko je plošča izpostavljena ultravijolični svetlobi.

Opozoriti je treba, da je vsaka opazovana barva posledica proizvodnje specifičnega pigmenta. Modro-zeleni pigment ustreza proizvodnji pocianina, zelene do pioverdina, rdečkaste do piorrubinske, rjave do piomelaninske in svetlo rumenkasto-zelene fluorescence pod ultravijolično svetlobo do fluoresceina.

Priprava

Natehtamo 43 g dehidriranega medija in raztopimo v destilirani vodi. Dodajte 10 ml glicerola. Odnesite mešanico v vir toplote. Pustite vreti nekaj minut do popolnega raztapljanja.

Avtoklaviraj 15 minut pri 121 ° C. Pustite stati in postrezite v sterilnih petrijevkah, ko je temperatura okoli 50 ° C.

Pustite, da se strdi, obrnete, naročite v plakete in shranite v hladilnik do uporabe. Če želite posaditi plošče cetrimidnega agarja, jih je treba vnaprej odstraniti iz hladilnika in pustiti, da sprejme sobno temperaturo..

Končni pH medija mora biti 7,2 ± 0,2.

Barva dehidriranega medija je bež, pripravek pa je bel.

Uporabe

Cetrimidni agar se lahko uporablja za posaditev vseh vrst vzorcev, v katerih je prisotna Pseudomonas aeruginosa. Zato je uporaben na vseh področjih mikrobiologije (okoljski, industrijski, klinični, vodni in prehranski)..

Zelo pomembno je, da analiziramo bolnišnična okolja in tako lahko uporabimo korektivne mediacije, saj ta mikroorganizem doseže bolnike prek opreme, zdravil, raztopin in kontaminiranih zalog, ki jih uporablja bolnik..

Na ta način lahko mikroorganizem okuži spodnje dihalne poti, sečila in rane imunosupresiranih bolnikov..

Možno je tudi štetje kolonij P. aeruginosa v mikrobnih mejnih testih.

Poseljeno

Cetrimidni agar se lahko uporablja kot primarna kultura. Plošča se inokulira v enem od njenih robov in od tam porazdeli z izčrpanjem na preostalo ploščo. Tekoče vzorce lahko posadimo na površino z drigalsko lopatico.

Plošče inkubiramo v aerobiozi pri 37 ° C 24 ur inkubacije.

Omejitve

-Majhen odstotek sevov. \ T  Pseudomonas aeruginosa ne proizvajajo pocianina, tako da lahko interpretirate lažno negativno.

-Nekatere vrste Pseudomonas, ki so klinično pomembne, se v tem mediju zavirajo.

-Kljub upoštevanju opisanih lastnosti Pseudomonas aeruginosa, treba jih je potrditi z dodatnimi identifikacijskimi preskusi. Preskus, ki ne sme manjkati, je test oksidaze, ki mora biti pozitiven.

-Nekatere enterobakterije lahko rastejo v tem mediju in razvijejo rumeni pigment, vendar se razlikuje od njega Pseudomonas aeruginosa pri čemer pri izpostavljanju plošče ultravijolični svetlobi ni fluorescence.

-Serratia marcescens uspe razviti in izdelati roza pigment.

-Če so plaki, ki so zasejani s cetrimidnim agarjem, izpostavljeni za čas pri sobni temperaturi, so sevi. \ T P. aeruginosa lahko izgubijo fluorescenco, ki jo opazimo pri ultravijolični svetlobi, vendar se lastnost obnovi, če se ponovno inkubira pri 37 ° C.

Nadzor kakovosti

Za preskus pravilnega delovanja cetrimidnega agarja se lahko uporabljajo kontrolni sevi, kot so: \ t Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 in Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Pričakovani rezultati so:

  • Za P. aeruginosa dobra rast, z modro zelenkastim pigmentom in pozitivno fluoresceinom.
  • S. maltophilia in S. aureus bo delno ali popolnoma zavrto.
  • Pričakuje se, da Escherichia coli biti popolnoma zavrto.

Reference

  1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. Fenotipska in serološka karakterizacija kliničnih izolatov iz Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Laboratoriji Conda Pronadisa. Cetrimidna baza agarja. 2014. Na voljo na: condalab.com
  3. Laboratoriji Britania. Cetrimida agar. 2015. Na voljo na: britanialab.com
  4. BD Laboratories BD Pseudosel agar (cetrimidni agar). 2013. Na voljo na: bd.com
  5. Francisco Soria Melguizo Laboratory, C.A. Cetrimid agar. 2009. Na voljo na: http://f-soria.es