Kaj je preprosto barvanje? Vrhunske funkcije



The preprosto barvanje je hiter in enostaven postopek barvanja, v katerem se uporablja eno barvilo, zato se imenuje preprosto. Uporablja se predvsem za določanje morfologije in organizacije celic, prisotnih v vzorcu.

Seveda celice nimajo barve, zato je potrebno, da so na neki način vidne, ko jih opazujemo v mikroskopu.

Pomembno je poudariti, da morajo biti barvila, ki se uporabljajo pri enostavnem barvanju, bazična s pozitivnim nabojem (kationski), tako da se lahko spontano vežejo na celično steno in citoplazmo..

Te celične strukture so negativno nabite. Zato se barva, pozitivno nabita, privablja v celice in se spontano veže na njih. Tako so vse celice v vzorcu hitro obarvane.

Barve, ki se uporabljajo pri enostavnem barvanju

Obstaja več osnovnih barvil, ki se lahko uporabljajo v mikrobiološkem laboratoriju. Najbolj uporabljeni so:

- Metilen modra.

- Kristalno vijolična.

- Malahitno zelena.

- Osnovni fuksin.

Vse te barve dobro delujejo v bakterijah, ker imajo pozitivno nabite (kationske) obarvane ione (kromofore)..

Časi barvanja za večino teh barvil so relativno kratki. Običajno segajo od 30 sekund do 2 minut, odvisno od afinitete barvila.

Pomembno je vedeti, da je treba pred barvanjem vzorca s preprostim barvanjem podaljšati in pritrditi na stekelno stekelce; Razširjeni in fiksni vzorec se imenuje razmaz.

6 korakov za enostavno obarvanje

1. korak

Položite drsnik na stojalo za madeže in nanesite želeno barvilo. Pustite ustrezen čas.

Običajno, enostavno barvanje traja nekaj sekund ali nekaj minut, odvisno od uporabljene barve.

Opazovanje

V tem koraku je pomembno, da ne presežete priporočenega časa za uporabljeno barvo, saj se lahko na listu oblikujejo kristali, ki proizvajajo tako imenovane "artefakte", ki izkrivljajo morfologijo celic..

2. korak

Previdno speremo stekelce z destilirano vodo iz steklenice ali tudi s tekočo vodo, ki teče počasi, dokler odtekanje ne postane prosojno. To običajno traja 5 do 10 sekund.

Opazovanje

Vodnega toka ne nanašajte neposredno na razmaz, da preprečite poškodbo vzorca.

Če ne uporabljate destilirane vode, lahko uporabite vodo iz pipe brez težav, saj to ne bo vplivalo na rezultat obarvanja.

3. korak

Posušite tobogan z vpojnimi papirnatimi brisačami v eni smeri in brez drgnjenja. Poskrbite, da je dno drsnika čisto.

4. korak

Opazujte obarvani razmaz v mikroskopu. Začnite z najbolj oddaljenimi cilji, da pravilno določite območje, ki ga želite podrobneje opazovati. Spremeni cilj, da se približamo vzorcu.

Opazovanje

Za uporabo objektiva z največjo povečavo (običajno 100X) je treba uporabiti potopno olje, saj pomaga svetlobi, da bolje prodre in je slika ostrejša. Ni potrebno uporabiti kritja.

Korak 5

Nazadnje vse vzorce zavrzite v ustrezno posodo, ki je ustrezno označena kot "biološka nevarnost"..

Reference

  1. (2001). Mikrobiološke aplikacije: Laboratorijski priročnik v splošni mikrobiologiji (8 th ed.). Podjetja McGraw-Hill.
  2. Harisha, S. (2006). Uvod v praktično biotehnologijo (1st). Mediji za požarni zid.
  3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D.P. (2009). Predhodno barvanje bakterij: enostavne madeže. Aktualni protokoli v mikrobiologiji, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Alcamovi laboratorijski temelji mikrobiologije (10th). Učenje Jones & Bartlett.
  5. Prescott, H. (2002). Laboratorijske vaje iz mikrobiologije (5 th). Podjetja McGraw-Hill.
  6. Sumbali, G. in Mehrotra, R. (2009). Načela mikrobiologije (1st). Tata McGraw-Hill Izobraževanje.