Vrste biokemičnih testov, za kaj so pomembne



The biokemični testi v mikrobiologiji gre za niz kemijskih testov, ki se izvajajo na mikroorganizmih, ki so prisotni v vzorcu, da bi jih prepoznali; Ti mikroorganizmi so ponavadi bakterije. Mikrobiologu je na voljo veliko biokemičnih testov.

Vendar pa izbira teh testov temelji na predhodnih ugotovitvah, kot so Gramov vzorec barve in znaki rasti, ki omogočajo, da se bakterije pripišejo določeni kategoriji. Biokemični testi temeljijo predvsem na presnovnih lastnostih vsake vrste bakterij. 

Vse bakterije nimajo enakih lastnosti, zato se preučuje, ali imajo določen encim z dodajanjem substrata in čakajo, da pride do reakcije. Običajno se to določanje opravi s spremembo barve ali pH v gojišču kulture.

Za zanesljivo identifikacijo bakterije do vrste je pogosto potrebnih manj kot 15 biokemičnih testov. Opravljanje več biokemičnih testov lahko poveča zaupanje v identifikacijo.

Večina teh biokemičnih testov se izvaja v serumu ali krvni plazmi. Lahko pa se izvajajo tudi v drugih bioloških izločkih, kot so urin, cerebrospinalna tekočina, plevralna tekočina in blato, med drugim..

Indeks

  • 1 Razvrstitev
    • 1.1 Univerzalno
    • 1.2 Razlike
    • 1.3 Posebni
  • 2 Vrste biokemičnih testov
    • 2.1 Katalazni preskus
    • 2.2 Test oksidaze
    • 2.3 Preskus soljenega manitolnega agarja (MSA)
    • 2.4 Test koagulaze
    • 2.5 Preskus ureaze
  • 3 Kaj so biokemični testi??
  • 4 Pomen
  • 5 Reference

Razvrstitev

Biokemične teste lahko razvrstimo v tri skupine:

Univerzalno

To so testi, ki jih je mogoče izvesti na katerem koli vzorcu in ki vodijo mikrobiologa pri naslednjih biokemičnih preskusih, ki jih je treba izvesti, da bi dobili zanesljivo identifikacijo..

Primer

Test katalaze in oksidaze.

Razlike

To so testi, ki se izvajajo za identifikacijo mikroorganizmov, prisotnih v vzorcu, do ravni vrste.

Identifikacija se opravi na podlagi rezultatov kombinacije testov, saj posamezni rezultati niso dovolj informativni za identifikacijo.

Primer

Testi IMViC in preskusi izkoriščanja sladkorja.

Posebno

To so posebni testi za določeno vrsto vrst ali za podtip vrste. Ti testi se običajno opravijo za potrditev ali identifikacijo na ravni podvrst. Posamezni testi so sami po sebi informativni.

Primer

Test γ-glutamil aminopeptidaze.

Vrste biokemičnih testov

Test katalaze

Katalazni test je test za dokazovanje prisotnosti encima katalaze z razgradnjo vodikovega peroksida v kisik in vodo. Na kapljico vodikovega peroksida (3%) dodamo majhno količino bakterij.

Katalazni test je preprost test, ki ga uporabljajo mikrobiologi za identifikacijo vrst bakterij in za določitev sposobnosti nekaterih mikroorganizmov, da razgradijo vodikov peroksid s proizvodnjo encima katalaze.

Če opazimo mehurčke kisika, to pomeni, da ima bakterija encim katalaze, ker katalizira razgradnjo vodikovega peroksida v kisik in vodo. Rečeno je torej, da je organizem pozitiven na katalazo (na primer: Staphylococcus aureus).

Test oksidaze

Ta test se uporablja za identifikacijo mikroorganizmov, ki vsebujejo encim citokrom oksidazo (pomembno v verigi prenosa elektronov). Običajno se uporablja za razlikovanje med družinami Enterobacteriaceae in Pseudomadaceae.

Citokrom oksidaza prenaša elektrone iz transportne verige elektronov v kisik (končni akceptor elektrona) in ga reducira v vodo. Preskusi z oksidazo zagotavljajo umetne molekule darovalca in akceptorja elektrona.

Ko se donor elektrona oksidira z delovanjem citokrom oksidaze, postane medij temno vijoličen in velja za pozitiven rezultat. Mikroorganizem Pseudomonas aeruginosa je primer bakterije pozitivne oksidaze.

Test slanih manitolovih agarjev (MSA)

Ta vrsta preskusa je selektivna in diferencialna. V MSP bodo izbrani organizmi, ki bodo lahko živeli v okoljih z visokimi koncentracijami soli, kot so vrste Staphylococcus v nasprotju z vrstami Streptokok, katerih rast je pod temi pogoji ovirana.

Diferencialna komponenta tega testa je sladkorni manitol. Organizmi, ki lahko uporabljajo manitol kot vir hrane, bodo proizvedli stranske produkte fermentacije, ki so kisli in bodo zato znižali pH medija..

Kislost medija povzroči, da indikator pH, fenol rdeča, postane rumena. Primeri vrst bakterij, ki se lahko razlikujejo po tej metodi, so: Staphylococcus aureus (pozitivno, ker fermentira manitol) in Staphylococcus epidermidis (negativno, ker manitol ne fermentira).

Test koagulaze

Koagulaza je encim, ki pomaga koagulirati krvno plazmo. Ta test se izvaja na pozitivnih gram-pozitivnih in katalazno pozitivnih bakterijah za identifikacijo Staphylococcus aureus (pozitivna koagulaza) Dejansko je koagulaza virulenčni faktor te bakterijske vrste.

Nastajanje strdkov okoli okužbe, ki jo povzroča ta bakterija, jo verjetno varuje pred fagocitozo. Ta test je zelo uporaben, če želite razlikovati med Staphylococcus aureus drugih vrst. \ t Staphylococcus ki so negativna koagulaza.

Test ureaze

Ta test se uporablja za identifikacijo bakterij, ki lahko hidrolizirajo sečnino z uporabo encima ureaze. Običajno se uporablja za razlikovanje med spoloma Proteus drugih encimskih bakterij.

Hidroliza sečnine proizvaja amoniak kot enega svojih proizvodov. Ta šibka baza poveča pH medija nad 8,4 in indikator pH (fenol rdeča) se spremeni iz rumene v rožnato. Primer pozitivne bakterije ureaze je Proteus mirabilis.

Kaj so biokemični testi??

Biokemični testi v mikrobiologiji se uporabljajo za diagnosticiranje bolezni, ki jih povzročajo mikrobi, in za spremljanje zdravljenja, ki se izvaja v boju proti njim. Poleg tega se uporabljajo za presejalne preglede nalezljivih bolezni in njihovo prognozo..

Biokemijska identifikacija mikroorganizmov ponuja idejo o tem, kaj lahko ti mikroorganizmi počnejo, pri čemer je možna diskriminacija različnih sevov iste vrste s posebnimi biokemičnimi profili..

Razlike v specifičnih encimskih aktivnostih so informativne o ekologiji, fiziologiji ali naravnem življenjskem okolju mikroorganizma, kar je v nekaterih primerih lahko pomembna informacija..

Pomen

Strukturne razlike glede na obliko, velikost in razporeditev bakterij zelo malo pomagajo pri identifikaciji, saj obstaja veliko vrst bakterij, ki imajo podobno obliko, velikost in razporeditev..

Zato identifikacija bakterij temelji predvsem na razlikah v biokemičnih aktivnostih.

Vsaka vrsta bakterij ima dobro opredeljen niz presnovnih dejavnosti, ki se razlikujejo od vseh drugih vrst. Ti biokemični "prstni odtisi" so lastnosti, ki jih nadzirajo bakterijski encimi.

Tako so biokemični testi pomembni, ker pomagajo raziskovalcu, da pravilno identificira patogene, ki so prisotni v vzorcu, in na ta način lahko priporočijo ustrezno zdravljenje bolniku..

Reference

  1. Beckett, G., Walker, S. in Rae, P. (2010). Klinična biokemija (8. izd.). Wiley-Blackwell.
  2. Clarke, P.H., & Cowan, S.T. (1952). Biokemijske metode za bakteriologijo. Journal of General Microbiology, 6(1952), 187-197.
  3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. in O'Reilly, J. (2013). Klinična biokemija (5. izd.). Elsevier Health Sciences.
  4. Goldman, E. in Green, L. (2008). Praktični priročnik za mikrobiologijo (2. izd.). CRC Press.
  5. Harrigan, W. (1998). Laboratorijske metode v živilski mikrobiologiji (3. izd.). Academic Press.
  6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktična mikrobiologija. BI Publikacije Pvt Ltd.