Nepelometrija v tem, kaj sestavljajo in aplikacije
The nefelometrija sestoji iz merjenja sevanja, ki ga povzročajo delci (v raztopini ali suspenziji), s čimer se meri moč razpršenega sevanja pod kotom, ki ni smer vpadnega sevanja..
Ko delce v suspenziji doseže žarek svetlobe, je del svetlobe, ki se odbija, drugi del se absorbira, drugi del se preusmeri in ostalo se prenese. Zato, ko svetloba udari v prozoren medij, v katerem je suspenzija trdnih delcev, se suspenzija opazi motna.
Indeks
- 1 Kaj je nefelometrija??
- 1.1 Disperzija sevanja z delci v raztopini
- 1.2 Nephelometer
- 1.3 Odstopanja
- 1.4 Meroslovne značilnosti
- 2 Aplikacije
- 2.1 Odkrivanje imunskih kompleksov
- 2.2 Druge aplikacije
- 3 Reference
Kaj je nefelometrija??
Disperzija sevanja z delci v raztopini
V trenutku, ko žarek svetlobe zadene delce snovi v suspenziji, smer širjenja žarka spremeni smer. Ta učinek je odvisen od naslednjih vidikov:
1.Dimenzije delcev (velikost in oblika) \ t.
2. Značilnosti suspenzije (koncentracije) \ t.
3. Valovna dolžina in intenzivnost svetlobe.
4. Razdalja vpadne svetlobe.
5. Kot zaznavanja.
6. Indeks refrakcije medija.
Nefelometer
Nefelometer je instrument, ki se uporablja za merjenje delcev, suspendiranih v tekočem vzorcu ali v plinu. Tako fotocelica, nameščena pod kotom 90 ° glede na svetlobni vir, zazna sevanje delcev, ki so prisotni v suspenziji.
Tudi svetloba, ki jo delci odsevajo proti fotocelici, je odvisna od gostote delcev. Diagram 1 prikazuje osnovne sestavine, ki sestavljajo nefelometer:
A. Vir sevanja
Pri nefelometriji je zelo pomembno imeti vir sevanja z visoko svetilnostjo. Obstajajo različne vrste, od ksenonskih žarnic in živosrebrnih sijalk, volframovih halogenskih žarnic, laserskega sevanja,.
B. Monokromatorski sistem
Ta sistem se nahaja med virom sevanja in kiveto, tako da se na ta način izognemo vpadanju na kiveto sevanja z različnimi valovnimi dolžinami v primerjavi z želenim sevanjem..
V nasprotnem primeru bi fluorescenčne reakcije ali ogrevalni učinki v raztopini povzročili odstopanja od meritev.
C. Bralna kiveta
To je na splošno prizmatična ali cilindrična posoda in ima lahko različne velikosti. V tem je rešitev v študiji.
D. Detektor
Detektor se nahaja na določeni razdalji (običajno zelo blizu rezervoarja) in je odgovoren za odkrivanje sevanja, ki ga razpršijo delci suspenzije..
E. Sistem branja
Na splošno gre za elektronski stroj, ki sprejema, pretvarja in obdeluje podatke, ki so v tem primeru meritve, pridobljene iz opravljene študije.
Odstopanja
Vsaka meritev je odvisna od odstotka napake, ki se v glavnem nanaša na:
Kontaminirana vedra: v kivetah je vsako sredstvo, ki je zunaj raztopine študije, ki je znotraj ali zunaj kivete, zmanjšalo sevalno svetlobo na poti do detektorja (okvarjene kivete, prah, ki se je prilepil na stene kivete).
Motnje: prisotnost nekaterih mikrobnih kontaminantov ali motnosti razprši sevalno energijo, kar poveča intenzivnost disperzije.
Fluorescentne spojineTo so spojine, ki ob vzbujanju z vpadnim sevanjem povzročajo napačne in visoke odčitke gostote disperzije.
Ohranjanje reagentov: neustrezna temperatura sistema lahko povzroči neželene pogoje za študijo in spodbudi prisotnost motnih reagentov ali oborin.
Nihanja električne energije: Da bi preprečili, da bi vpadno sevanje povzročilo napake, se priporočajo stabilizatorji napetosti za enotno sevanje.
Meroslovne značilnosti
Ker je sevalna moč odkritega sevanja neposredno sorazmerna z masno koncentracijo delcev, imajo nefelometrične študije v teoriji večjo meroslovno občutljivost kot druge podobne metode (npr. Turbidimetrija)..
Poleg tega ta tehnika zahteva razredčene raztopine. To omogoča zmanjšanje absorpcijskih in refleksijskih pojavov.
Aplikacije
Nefelometrične študije imajo zelo pomembno mesto v kliničnih laboratorijih. Uporablja se od določanja imunoglobulinov in proteinov akutne faze, komplementa in koagulacije.
Odkrivanje imunskih kompleksov
Kadar biološki vzorec vsebuje antigen, ki nas zanima, ga zmešamo (v pufrski raztopini) s protitelesom, da tvorimo imunski kompleks.
Nefelometrija meri količino svetlobe, ki jo raztaplja reakcija antigen-protiteles (Ag-Ac), in na ta način odkrijejo imunske komplekse..
Ta študija se lahko izvede na dva načina:
Nefelometrija končne točke:
Ta tehnika se lahko uporabi za analizo končne točke, v kateri je protitelo proučevanega biološkega vzorca inkubirano 24 ur.
Kompleks Ag-Ac se meri z nefelometrom, količina razpršene svetlobe pa se primerja z isto meritvijo, ki je bila izvedena pred nastankom kompleksa..
Kinetična nefelometrija
Pri tej metodi se stalno spremlja hitrost tvorbe kompleksov. Hitrost reakcije je odvisna od koncentracije antigena v vzorcu. Tu so meritve opravljene kot funkcija časa, tako da se prva meritev izvede v času "nič" (t = 0).
Kinetična nephelometrija je najbolj uporabljena tehnika, saj se lahko študija izvede v 1 uri, v primerjavi z dolgim časom metode končne točke. Razmerje disperzije se meri takoj po dodajanju reagenta.
Torej, dokler je reagent konstanten, se količina prisotnega antigena šteje za neposredno sorazmerno s hitrostjo spremembe.
Druge aplikacije
Nefelometrija se običajno uporablja pri analizi kakovosti kemikalij za vodo, za določanje jasnosti in za nadzor procesov njene obdelave.
Uporablja se tudi za merjenje onesnaženosti zraka, pri katerem se koncentracija delcev določi iz disperzije, ki jo proizvajajo v vpadni svetlobi..
Reference
- Britannica, E. (s.f.). Nefelometrija in turbidimetrija. Izterjal iz britannica.com
- Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetrija in nefelometrija. Vzpostavljeno iz pdfs.semanticscholar.org
- Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Izterjano iz technochemical.com
- Morais, I. V. (2006). Analiza turbidimetričnih in nefelometričnih pretokov. Vzpostavljeno iz repositorio.ucp.p
- Sasson, S. (2014). Načela nefelometrije in turbidimetrije. Vzpostavljeno iz notesonimmunology.files.wordpress.com
- Stanley, J. (2002). Osnove imunologije in serologije. Albany, NY: Thompson Learning. Vzpostavljeno iz books.google.co.ve
- Wikipedija. (s.f.). Nefelometrija (zdravilo). Vzpostavljeno iz en.wikipedia.org